Gıda örneklerinde ve sularda Escherichia coli tayinine yönelik biyosensör geliştirilmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Gıda Mühendisliği A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2011
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ÖZLEM TORUN
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): İSMAİL HAKKI BOYACI
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Mikroorganizmaların hassas ve hızlı bir şekilde tayin edilmesi; biyosavunma, gıda güvenliği, hastalıkların teşhisi ve ilaç bulgularının belirlenmesi gibi birçok konuda kilit noktayı oluşturmaktadır. Bu çalışmada, su ve gıdalardaki patojen bakterilerin hassas ve seçici bir şekilde saptanabilmesi için yüzey plazmon resonansı (YPR) spektroskopisi kullanılarak hızlı, güvenilir bir analiz sisteminin oluşturulması hedeflenmiştir. Model bakteri olarak Escherichia coli (E. coli)`nin kullanıldığı çalışmada; E. coli antikorunun sensör yüzeyine seçici olmayan bir şekilde tutuklanması yöntemi, E. coli antikorunun avidin-biyotin etkileşimi ile sensör yüzeyine seçici bir şekilde tutuklanması yöntemi, kovalent bağlama yöntemi ve manyetik ayırma ile YPR spektroskopisinin birleştirildiği, altın kaplı manyetik nanopartiküllerin kullanımına dayalı yöntem denenmiştir.E. coli tayini için denenen yöntemler arasında en hızlı ve en hassas yöntemin; altın kaplı manyetik nanopartiküllerin kullanımına dayalı olan yöntem olduğu görülmüştür. Bu yöntem, yüzeyleri immobilize edilen manyetik altın nanopartiküllerle düşük miktarlardaki E. coli'nin bir ortamdan seçici olarak ayrılmasını ve sonrasında hiç bir işaretleme yapılmaksızın YPR sisteminde hızlı bir şekilde belirlenmesini mümkün kılmaktadır. Yöntem, 104 kob/ml E. coli derişimine kadar doğrusal cevap vermektedir (R2=0.995). Ayrıca geliştirilen yöntemin gözlenebilme sınırı 2 kob/ml, alt tayin sınırı 6 kob/ml olarak saptanmıştır. Geliştirilen analiz yöntemiyle sularda ve beyaz peynirde E. coli tayini yapılmış ve elde edilen cevapların kültürel sayım yöntemiyle benzerlik gösterdiği belirlenmiştir.