Memeli kıkırdak dokusundan kondrosit ve kondroprojenitör hücrelerin eldesi ve bu hücrelerin mikrotaşıyıcı polimerik malzemelerle kültürasyonu
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2010
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: GAYE ÇETİNKAYA
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): MEHMET ALİ ONUR
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Memeli hücre kültürlerinde uzun süredir kullanılan mikrotaşıyıcılar ile birim hacimdeki yüzey alanı arttırılarak iki boyutlu hücre kültür kaplarına oranla daha az iş gücü ve maliyetle daha çok hücre üretmek mümkündür. Mikrotaşıyıcılı sistemlerdeki başlıca sorunlardan biri, fiziksel veya fizyolojik harabiyet verilmeden hücrelerin polimerik yüzeylerden ayrılmalarıdır. Kullanılan enzimatik yöntemlerin çoğu zaman ve kaynak israfına yol açarken hücrelere de zarar vermektedir.Bu çalışmada üç aylık sığır fetusunun eklem kıkırdak dokusundan kollajen tip 2 ve vimentin pozitif kondroprojenitör hücreler ve bir yaşındaki sığırın eklem kıkırdak dokusundan kondrosit hücre hatları geliştirilmiştir. Populasyon katlanma süreleri ve üreme kinetikleri incelenen kondroprojenitör ve kondrosit hücrelerine onbeş farklı besiyeri uygulanmış ve bu hücrelerin üretilmeleri için en uygun mikroçevre tanımlanmıştır.Çalışmanın ikinci kısmında kondroprojenitör ve kondrosit hücreleri mikrotaşıyıcılı sisteme adapte edilmiş ve Cytodex-1 mikrotaşıyıcılarının üzerinde biyoreaktörlerde üreme kinetikleri incelenmiştir. Polimerik yüzeylere dört saat içinde tutunan kondroprojenitör hücrelerin mikrotaşıyıcılı sistemlerden ne kadar oranda sağlıklı bir şekilde geri kazanılabildiğinin araştırıldığı bu çalışmada farklı enzimatik yöntemler uygulanmış ve en iyi sonuç pronaz enzimiyle elde edilmiştir. Sonuçlar mikrotaşıyıcılı sistemlerden canlı ve fonksiyonel hücrelerin elde edilebilmesi için enzimatik yöntemlerin optimize edilmesi gerektiğini göstermiştir.Çalışmanın üçüncü kısmında Cytodex-1 ve Biosilon ticari mikrotaşıyıcıları ile Gümüşderelioğlu ve ekibi tarafından sentezlenen sıcaklık duyarlı PHEMA-PNIPAAm kürelerinde hücrelerin karşılaştırmalı olarak tutunma başarıları ve üreme eğrileri incelenmiştir. Sonuçlar sıcaklık duyarlı PHEMA-PNIPAAm kürelerinin hücre tutunması ve gelişimini desteklediğini, yüzey modifikasyonlarıyla ticari polimerler kadar başarılı olabileceğini ortaya koymuştur.Bu çalışmada PHEMA-PNIPAAm polimerleri `sıcaklık duyarlı mikrotaşıyıcı modeli' olarak kullanılmış ve biyouyumluluk özellikleri incelenmiştir. Sonuçlar ticari sıcaklık duyarlı bir mikrotaşıyıcının hücre üretiminin hedeflendiği sistemlerde oldukça faydalı olacağını ortaya koymuştur.