Bilirubin tayini için moleküler baskılanmış sensörlerin hazırlanması
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2014
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ÇİĞDEM ÇİÇEK
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): HANDAN YAVUZ ALAGÖZ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Yapılan çalışmanın amacı hiperbilirubinemili insan serumundan ve bilirubin sulu çözeltisinden bilirubin tayinine yönelik kuvars kristal mikroterazi sensör hazırlanmasıdır. QCM biyosensör, QCM çipin altın yüzeyine bilirubin baskılanmış PHEMATrp nanofilminin tutturulması ile hazırlanmıştır. Kompleksleştirici monomer olarak metakroiltriptofan (MATrp) seçilmiştir. İlk olarak metakroiltriptofan metil esteri ve metakroil klorür reaksiyonundan metakroiltriptofan (MATrp) sentezlenmiş ve FTIR ile karekterize edilmiştir. Daha sonra bilirubin MATrp ile ön kompleksleştirilerek bilirubin baskılanmış poli(2-hidroksietil metakrilat-N-metakroil triptofanmetil esteri) (PHEMATrp) MIP nanofilmi fotopolimerizasyon ile sentezlendi. Ayrıca baskılanmamış PHEMATrp (NIP) nanofilmi aynı yöntemle sadece ortamda kalıp molekül (bilirubin) eklenmeksizin sentezlenmiştir. Bilirubin baskılanmış polimer çözeltisi QCM çipin altın yüzeyine damlatılıp, UV lamba altında 20 dakika polimerleşmesi sağlanmıştır. Hazırlanan QCM sensörler, atomik kuvvet mikroskobu (AFM), elipsometre, FTIR-ATR ve temas açısı ölçümleri ile karaterize edilmiştir. Kalınlık ölçümleri ve AFM görüntüleri, nanofilmlerin tek tabakalı olduğunu göstermiştir. Karakterizasyon çalışmalarının ardından elde edilen baskılanmış ve baskılanmamış sensörler QCM sistemine bağlanarak hedef moleküle ait kinetik ve afinite bağlanma çalışmaları yapılmıştır. Daha sonra kan serumu QCM sensöre gönderilerek serumdaki bilirubin miktarı tayin edilmiştir. Baskılanmış nanofilmin, baskılanmamış nanofilme göre hedef moleküle (bilirubin) daha fazla duyarlılık göstermiştir. Adsorpsiyon kinetikleri farklı derişimlerdeki bilirubin çözeltisinin QCM sisteminden geçirilmesi ile belirlenmiştir. Langmuir adsorpsiyon modeli, bu afinite sistemi için en uygun model olarak bulunmuştur. Bilirubin baskılanmış PHEMATrp nanofilmin seçiciliğini göstermek için bilirubin, kolesterol ve östrodiol yarışmacı adsorbsiyonu araştırılmıştır. Sonuçlar, baskılanmış sensörlerin bilirubin için yüksek seçiciliğe ve duyarlılığa sahip olduğunu göstermektedir.