Invasiv meme kanseri hücresi tayini için kuvars kristal mikroterazi sensörlerin hazırlanması
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Nanoteknoloji ve Nanotıp A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2014
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: SEDA ATAY
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): HANDAN YAVUZ ALAGÖZ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Yapılan çalışmanın amacı yüksek oranda invaziv insan meme kanseri hücresi tayinine yönelik kuvars kristal mikroterazi sensör hazırlanmasıdır. Sensörün seçiciliği için meme kanseri hücresi yüzeyindeki aşırı eksprese olmuş transferrin reseptörü ile transferrin etkileşiminden faydalanılmıştır. QCM biyosensör, QCM çipin altın yüzeyine tutturulan Poly(2-hidroksietil metakrilat) (pHEMA) partiküllerin transferrin ile modifiye edilmesiyle hazırlanmıştır. Nanopartiküller etilen glikol dimetakrilat (EDMA) ve 2-hidroksietil metakrilat (HEMA)' nın miniemülsiyon polimerizasyon reaksiyonu ile hazırlanmıştır. Nanopartiküller zeta boyut analizi ile karakterize edilmiştir. Daha sonra hazırlanan nanopartiküller, az miktarda nanopartikül çözeltisinin altın yüzeye damlatılmasıyla ve sonra 37°C'da 6 saat kurutulmasıyla tutturulmuştur. QCM çipin yüzeyine yerleştirilen p(HEMA) partiküller transferrin ile modifiye edilmiştir. Bunun için, aktivasyon ajanı olarak karbodiimit kullanılmıştır. pH' sı 7.4'e ayarlanmış fosfat tamponu içine yüzeyinde p(HEMA) partikül bulunan çip, karbodiimit ve transferrin konulmuştur. QCM çip yüzeyindeki p(HEMA) partiküllerin transferrin ile modifiye olması için 24 saat çalkalamalı etüvde, oda sıcaklığında bekletilmiştir. Transferrinsiz QCM sensör hazırlanırken p(HEMA) partiküller modifiye edilmemiştir. Hazırlanan QCM sensörler atomik kuvvet mikroskobu (AFM), elipsometre, FTIR-ATR ve temas açısı ölçümleri ile karakterize edilmiştir. Kalınlık ölçümleri ve AFM görüntüleri, nanopartiküllerden oluşan ince filmlerin hemen hemen tek tabakalı olduğunu göstermektedir. Karakterizasyon çalışmaları ardından hazırlanan transferrinli ve transferrinsiz sensörler QCM sistemine bağlanarak yüksek oranda invaziv meme kanseri hücresine ait kinetik ve afinite bağlanma çalışmaları yapılmıştır. Adsorbsiyon kinetikleri farklı derişimlerdeki insan meme kanseri hücre hattı olan MDA-MB-231 'den hazırlanan hücre çözeltisinin QCM sisteminden geçirilmesi ile belirlenmiştir. Langmuir- Freundlich adsorbsiyon modeli, bu afinite sistemi için en uygun model olarak bulunmuştur. Transferrin modifiyeli sensörün seçiciliğini göstermek için insan meme kanseri hücre hatlarından olan MDA-MB-231(Yüksek oranda invaziv), MCF-7 ( daha az oranda invaziv) ve serum ve medyumdan yoksun bırakılmış MDA-MB-231 (hücre yüzey yapısı bozulmuş) hücrelerinin yarışmalı adsorbsiyonu araştırılmıştır. Sonuçlar sensörün, yüksek oranda invaziv olan MDA-MB-231 hücre soyu için yüksek seçiciliğe ve duyarlılığa sahip olduğunu göstermektedir.