İnsan serum bütirilkolinesterazı ve eritrosit asetilkolinesterazının statin türevleri ile etkileşiminin incelenmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Biyokimya A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2014
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: MELTEM ATAY
Danışman: Ebru Bodur
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Statinlerin Kolinesterazlarla etkileşimlerini araştırmak amacıyla, Bütirilkolinesteraz (BKE; E.C.3.1.1.8) insan serumundan asitli diyaliz, DEAE Trisakril M ve Prokainamid Sefaroz 4B kromatografisi basamaklarının ardından 867.93 kez saf elde edildi. Saflaştırılan insan serum BKE'sinin asetiltiyokolin (ATK), bütiriltiyokolin (BTK), propiyoniltiyokolin (PTK) ve benzoyilkolin (BZK) substratları ile substrat seçiciliği, atorvastatin, lovastatin, rosuvastatin ve simvastatin adlı statin türevleri ile inhibisyon kinetiği çalışıldı. İnsan eritrosit AKE'nin (AKE; E.C.3.1.1.7) ATK ve yukarıda belirtilen statinlerle kinetiği çalışıldı. "Systat 12 non-lineer" regresyon analizi ile insan serum BKE'nin ATK, BTK, PTK ve BZK için Km değerleri μM cinsinden 216 ± 74, 62 ± 37, 155 ± 40 ve 24 ± 8 μM; eritrosit AKE'nin ATK için Km değeri 65 ± 16 μM olarak bulundu. BKE'nin ATK, BTK, ve PTK için Kss değerleri; 2.38 ± 0.39, 1.06 ± 0.47 ve, 4.53 ± 0.45 mM olarak; BKE'nin Kcat değerleri ise sırasıyla; 9.92 ± 0.71, 26.56 ± 8.18, 8.18, 10.56 ± 1.78 x 103 dak-1 olarak hesaplandı. BKE'nin ATK, BTK, PTK ve BZK için b değerleri 2.12 ± 0.30, 1.02, 7.49 ± 0.26 ve 10.780± 1.80 olarak. BKE'nin ATK, BTK, PTK ve BZK için bkcat değerleri sırasıyla; 21.06, 27.10, 61.23 ve 113.85 x 103 dak-1 olarak; kcat/km değerleri sırasıyla ise; 45.94, 428.50, 52.74 ve 0.43 x 104mM-1dak-1 olarak hesaplandı. Vm değerleri ise sırasıyla; 26.34 ± 2.22, 27.85 ± 2.84, 46.08 ± 3.55, 118.73 ± 19.84 μmol-1.dak.mg.prot olarak hesaplandı. İnsan serum BKE'nin atorvastatin, lovastatin, rosuvastatin ve simvastatin için IC50 değerleri; 7.24 ± 0.27, 14.20 ± 0.30, 1.03 ± 0.19 ve 17.60 ± 0.09 μM; Ki değerleri ise 492.54 ± 55.12, 198.65 ± 27.18, 194.68 ± 55.24ve 228.91 ± 43.78 μM; olarak saptandı. Sonuç olarak statinlerin Kolinesterazlarla oluşturduğu inhibisyonun tipi ilk defa bu çalışma ile ortaya çıkarıldı. Kullanılan statinlerin tümü insan serum BKE'nin non-kompetetif inhibitörü olarak bulundu. Eritrosit AKE için, lovastatin hariç diğer statinlerde inhibisyon gözlenmedi.