Boronat afinite kromatografisi için monolitik HPLC kolonları
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2011
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: YEŞEREN SAYLAN
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): ADİL DENİZLİ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu çalışmanın amacı, boronat afinite kromatografisi ile immunoglobulin G (IgG) ayrılması için monolitik HPLC kolonları hazırlamaktır.İlk aşamada, 4-vinil fenil boronik asit (VPBA) monomeri 2-hidroksietil metakrilat (HEMA) ile polimerleştirilmiştir. Yığın polimerizasyon sonucu elde edilen polimer, bilyalı değirmen kullanılarak öğütülmüş ve fenil boronik asit içeren partiküller elde edilmiştir. Daha sonra bu partiküller, poli(2-hidroksietil metakrilat) (PHEMA) kriyojellerin içine gömülerek monolitik kompozit HPLC kolonları hazırlanmıştır. Ayrıca sadece PHEMA bazlı kriyojel de sentezlenerek polimerler arasındaki farklar ortaya konulmuştur.Hazırlanan kompozit HPLC kolonları yüzey alanı ölçümleri (BET), taramalı elektron mikroskobu (SEM), Fourier Transform İnfrared spektroskopisi (FTIR), elementel analiz, şişme testleri ve akış hızı-geri basınç ilişkisi ile karakterize edilmiştir.Karakterizasyon basamaklarından sonra monolitik kompozit kriyojeller, HPLC sistemine bağlanmış ve IgG ayırma performansları belirlenmiştir. Bu aşamada pH, derişim, sıcaklık, akış hızı ve iyonik şiddet gibi parametreler incelenmiştir.Çalışmanın son aşamasında, belirlenen optimum koşullarda plazmadan protein ayrılması gerçekleştirilmiş ve kolonların immunoglobulin G (IgG)'ye olan seçiciliğini ortaya koymak amacıyla insan serum albumini (HSA) ile seçicilik deneyleri yapılmıştır.ANAHTAR KELİMELER: Boronat Afinite Kromatografi, Monolit Kompozit Kriyojel, HPLC, İmmunoglobulin G