Monoklonal antibadi saflaştırılması için eşboyutlu manyetik partiküllerin hazırlanması
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2010
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: NİLAY BERELİ
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): ADİL DENİZLİ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Sunulan tez çalışmasında insan plazmasından etkin bir şekilde immunoglobulin G saflaştırılması amacıyla yeni bir yaklaşım geliştirilmiştir. Pseudospesifik ligand N-metakroil-L-histidin metil ester (MAH), metakroil klorür ve histidin kullanılarak sentezlenmiştir. Polimerik yapıya manyetik özellik kazandırmak için Fe3O4 kullanılmış ve manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller dispersiyon polimerizasyonu ile (5 µm çapında) elde edilmiştir. Manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller, monomer faz olan EGDMA ve MAH yanında ortama farklı oranlarda manyetit (Fe3O4) eklenerek sentezlenmiştir. Manyetik ve manyetik olmayan poli(EGDMA-MAH) partiküller Fourier Transform İnfrared spektroskopisi (FTIR), taramalı elektron mikroskobu (SEM), elementel analiz, elektron spin rezonans (ESR), titreşimli örnek manyetometresi (VSM), temas açısı ölçümleri ve şişme deneyleri ile karakterize edilmiştir. Manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller için g faktörü 2.3 olarak bulunmuştur. Şişme oranı %65.0 olan ve 55.3 µmol MAH/g oranında MAH içeren manyetik poli(EGDMA-MAH) partiküller, hem kesikli hem de manyetik olarak akışkanlaştırılmış yatak sisteminde (MSFB) sulu çözeltilerden ve insan plazmasından IgG adsorpsiyon çalışmalarında kullanılmıştır. IgG adsorpsiyonunun kullanılan tampon sistemine bağlı olduğu gözlenmiştir. Maksimum adsorpsiyon pH 7.4'de gözlenmiştir. MSFB deneylerinde de sulu çözeltilerde aynı tamponlar kullanılarak çalışmalar gerçekleştirilmiştir. Maksimum adsorpsiyon kapasitesi 34.6 mg/g`dır. Kesikli ve MSFB sisteminde, insan plazmasından çok daha yüksek oranlarda IgG adsorpsiyonu gözlenmiştir (34.6 mg/g ve 1679.7 mg/g). Geliştirilen bu afinite partikülleri insan plazmasından IgG'nin tek adımda ayrılmasını sağlamıştır. Adsorpsiyon kapasitesinde önemli bir azalma olmaksızın manyetik partiküllerin tekrar tekrar kullanılabileceği gözlenmiştir.