Karaciğer ve meme kanseri hücrelerinde çoklu ilaç direnci ve apoptotik proteinlerin gen ekspresyon düzeylerinin incelenmesi

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Biyokimya A.B.D., Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2011

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: GÖZDE AYDIN

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): AYŞE ERCAN

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu tez çalışmasında, kanser hücrelerinde işleyişi hasarlı olan apoptotik, anti-apoptotik mekanizmaların ve çoklu ilaç direnci yolakların incelenmesi amacıyla, karaciğer kanseri hücre hattı (HepG2) ve meme kanseri hücre hattı (MCF-7) kullanılmıştır. Bu çalışmanın amacı: iki farklı kanser hücre hattını en etkili antikanser ilaçlardan biri olan Doksorubisin ile muamele ederek, apoptozun uyarılması ve apoptozda önemli rol oynayan birbiriyle ilişkili p53, Bcl-2 ve MDR-1 genlerinin ekspresyon düzeylerinin incelenmesidir. Bu amaçla hücreler ilaç ile muamele edilerek büyütülmüş, sonrasında RNA'ları saflaştırılmış, cDNA'ya dönüştürülmüş ve üç genin ekspresyon düzeyini belirlemek amacıyla RT-PCR cihazında kullanılmıştır. HepG2 hücrelerinde 50 nM, 200 nM, 400 nM ve 800 nM ilaç uygulanmasından sonra kontrol gruplarına kıyasla deney gruplarında, p53 geninin ekspresyon düzeylerinin sırasıyla 2,176, 1,718, 1,524, 1,225 kat arttığı, Bcl-2 gen ekspresyon düzeylerinin sırasıyla 4,182, 6,512, 5,641, 3,910 kat arttığı ve MDR-1 gen ekspresyon düzeyinin ise uygulanan ilaç dozundan bağımsız olarak değişmediği gözlenmiştir. MCF-7 hücrelerinde 50 nM, 200 nM, 400 nM ve 800 nM ilaç uygulanmasından sonra kontrol gruplarına kıyasla deney gruplarında, p53 gen ekspresyon düzeylerinin sırasıyla 0,520, 0,349, 0,419, 0,338, Bcl-2 gen ekspresyon düzeylerinin sırasıyla 0,349, 0,269, 0,115, 0,096 ve MDR-1 gen ekspresyon düzeylerinin 0,612, 0,382, 0,282, 0,182 kat azaldığı gözlenmiştir. İki kanser hücre hattında p53 genomik dizisinin 72. kodonunda polimorfizm çalışması, restriksiyon enzimleri kullanılarak yapılmıştır. Bu deneyin sonucunda ise her iki hücre hattı için, p53 genomik dizisindeki 72. kodonun heterozigot Arg/Pro genotipine sahip olduğu tespit edilmiştir.