Interaction mechanisms between small cell lung cancer cells and T lymphocytes
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, TEMEL ONKOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2019
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: MUAMMER ALPER KURŞUNEL
Danışman: GÜNEŞ ESENDAĞLI
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Tümörler immün sistemden kaçmak için mikroçevrelerini yeniden şekillendirebilir. Bu amaçla, normal hücreler tarafından da immünopatolojileri engellemek için kullanılan immün düzenleyici mekanizmaları kullanırlar. Küçük hücreli akciğer kanseri (KHAK), agresif tümör gelişimi, erken yayılma ve uzak metastaz eğilimi ile ilişkilidir. Kemoterapi yanıtları optimal olarak başlamasına rağmen kısa sürede terapi direnci gelişir. KHAK'ın bu özellikleri kanser kök hücresi (KKH) konseptini işaret etmektedir. Son çalışmalar, KHAK'daki aday kök hücre popülasyonlarını tarif etmektedir. Mezenkimal ve kanser kök hücreler immün-tolerojenik olduğu belirtilmesine rağmen, KHAK kök hücrelerinin immün hücrelerle etkileşimlerinin sonuçları hakkında pek bilgi bulunmamaktadır. Bu sebeple bu çalışmanın amacı, kök hücre popülasyonu da dahil olmak üzere KHAK hücreleri ile T hücreler arasındaki etkileşimi tanımlamak ve KHAK kanseri immün düzenleyici mekanizmalarını ortaya koymaktır. Süspansiyon olarak büyüyen KHAK hücre dizileri (NCI-H82, NCI-H69, SCLC-21), NCI-H82 ve NCI-H69'dan izole edilmiş kök hücre benzeri plastiğe-tutunmuş alt klonlar ve NCI-H69'un alt klononundan saflaştırılmış CD44+CD90+ alt klonu kullanılmıştır. KKH özellikleri kondrosit, osteosit ve adiposit farklılaşması, tümör başlatma yetisi ve RNAseq bazlı transkriptomik analiz ile doğrulanmıştır. Sağlıklı gönüllülerden elde edilen periferik kan mononükleer hücreleri (PKMH), KHAK hücrele klonlarıyla αCD3 mAb varlığında kültüre edilmiş ve T hücresi aktivasyon belirteçlerinin ekspresyonu, proliferasyonu, sitokin üretimi ve inhibitör eş-reseptörlerinin ekspresyonu, T hücrelerde belirlenmiştir. KHAK hücrelerindeki PD-L1 ve PD-L2 ekspresyonu, IFN-γ uyarımı veya IFN-γ blokajı olan veya olmayan PKMH ko-kültürlerinde belirlenmiştir. PD-L1 ekspresyonunun CD8+ T hücresi çoğalması ve KHAK hücrelerinin T hücre sitotoksisitesi üzerine etkileri belirlenmiştir. KHAK ko-kültürlerinden elde edilen TIM-3+LAG3+ ve TIM-3-LAG3- CD8+ T hücrelerinin fonksiyonel kapasitesi in vitro ortamda değerlendirilmiştir. KHAK hücreleri, kök hücre-benzeri KHAK hücrelerince daha belirgin olacak şekilde T hücre aktivasyonuna izin verdi ve hatta desteklemiştir. Ayrıca kök hücre-benzeri KHAK hücreleri, IFN-γ ve aktive edilmiş PKMH'lere maruz kaldıklarında PD-L1 ve PD-L2'yi indükleyerek adaptif direnç özellikler sergilemiştir. Bununla birlikte, bu hücreler üzerinde PD-L1'in varlığı, sitotoksik T lenfositleri çoğalmasına ve KHAK hücrelerinin T-hücre sitotoksisitesine karşı hassasiyetlerinin düşmesine yol açmamıştır. Alternatif olarak, T hücreleri üzerinde ko-inhibitör reseptörlerinin ekspresyonu, T hücrelerini inhibitör sinyallerine açık hale getireceği için, KHAK hücrelerinin varlığında immün baskılanmaya daha yatkın olduğu belirlenmiştir. Özetlemek gerekirse, kök hücre-benzeri KHAK hücreleri, tümör mikroçevresinde inhibitör eş-uyaran moleküllerini indükleyerek, immün modülasyonunun düzenlenmesinde önemli rol oynayabilir ve bu bulgular gelecek immünoterapi yaklaşımlarında rol oynayabilir. Anahtar kelimeler: KHAK, KKH, eş-uyarım, T hücre, PD-1, PD-L1, TIM-3, LAG3