Altın nanopartiküller ile dekore edilmiş nanofiberlerde uyarıcı faktörlerin nörit uzaması üzerine etkisi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyomühendislik A.B.D., Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2015

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ÜLKÜ SELCEN DEMİR

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): KEZBAN ULUBAYRAM

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Nöronal hücrelerin aksonal uzaması sinir doku mühendisliğinin en önemli konusudur. Bu anlamda yönlendirilmiş nanofiberler, hücrelere kılavuzluk etmeleri sayesinde, nörit gelişiminin yönlendirilmesinde önemli rol üstlenirler. Son yıllarda yapılan çalışmalarda, nörit uzamasını uyarıcı çeşitli faktörlerin etkisi üzerine odaklanılmıştır. Bu çalışmanın ana hedefi yönlendirilmiş poliüretan nanofiberlerin altın nanopartiküller ile modifiye edilmesi ve bu yapılar üzerinde kültür edilen hücrelerde (PC12 ve B35) nörit uzamasına nanotopografyanın, biyolojik (Sinir Büyüme Faktörü, NGF) ve elektriksel uyarımların sinerjik etkisinin incelenmesidir. Bu amaç doğrultusunda ortalama 519 nm çapında, düzgün ve homojen morfolojiye sahip yönlendirilmiş poliüretan nanofiberler üretilmiştir. Daha sonra "çekirdek-büyütme" yöntemi ile ortalama çapı yaklaşık 50 nm olan altın nanopartiküller sentezlenmiş ve elektrostatik etkileşimlerle nanofiber yüzeylere dekore edilmiştir. İskelelerinin üretimini takiben, PC12 hücreleri sadece NGF veya NGF ile elektriksel uyarımın beraber uygulandığı koşullarda iskeleler üzerinde kültüre edilmiştir. Elektriksel uyarım için kare formunda, 100 mV büyüklüğe ve 10 ms dalga genişliğine sahip gerilim günde 1 saat olmak üzere 4 gün boyunca uygulanmıştır. Altın nanopartiküller ile modifiye edilmiş düzenli nanofiberlerin hücrelerin tutunmasını artırdığı ve nörit uzamasının fiber yönünde olduğu bulunmuştur. Immünositokimya sonuçları NGF stimülasyonunun aksonal uzamaları yaklaşık 190 µm'ye kadar artırdığını göstermiştir. En iyi aksonal uzamanın, NGF ve elektriksel uyarımların beraber uygulandığı koşullarda elde edildiği ve bu uzamanın yaklaşık 268 µm olduğu tespit edilmiştir. Sonuç olarak, altın nanopartikül kaplı yönlendirilmiş fiber yüzeylerin sağladığı avantajla birlikte NGF ve elektrik stimülasyonunun sinerjik etkisi nörit geliştirmiştir.