BMP-6 yüklü aljinat mikroküreler ve kitosan doku iskeleleri ile periodontal doku mühendisliği


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyomühendislik A.B.D., Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2010

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ZELİHA SORAN

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): MENEMŞE GÜMÜŞDERELİOĞLU

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Sunulan tez çalışmasında, periodontal kemik doku rejenerasyonunu desteklemek için kemik morfojenik proteini-6 (BMP-6) yüklü aljinat mikroküre içeren kitosan doku iskelelerinin üretimi amaçlanmıştır. Bu hedefe yönelik olarak aljinat mikrokürelerin üretim, karakterizasyon ve kitosan doku iskelelerine yüklenme çalışmaları yürütülmüş; ayrıca üretilen doku iskelelerinin etkinlikleri hücre kültür sistemlerinde araştırılmıştır.Tez kapsamında, ilk olarak %2 (w/v) polimer bileşimine sahip aljinat mikroküreler, elektrospreyleme tekniği kullanılarak üretilmiş, dondurarak kurutulmuştur. 37oC'de fosfat tampon çözeltisi içerisinde yürütülen şişme deneylerinin yanı sıra, hücre büyüme ortamında biyobozunurluk çalışmaları gerçekleştirilmiştir. Ek olarak optik mikroskop ve taramalı elektron mikroskop (SEM) görüntüleri kullanılarak yapılan karakterizasyon çalışmaları sonucunda 60 mL/sa akış hızı, 8 kV potansiyel fark ve 16 cm şırınga ucu-toplayıcı mesafesi koşullarında üretilen ve 360 µm ortalama çapa sahip aljinat mikrokürelerin amaca uygun olduğu belirlenmiştir.Mezenkimal kök hücrelerin osteojenik farklılaşmasında büyük bir öneme sahip olan BMP-6, üretim aşamasında mikrokürelere yüklenmiştir. In vitro salım çalışmaları, floresan izotiyosiyanat (FITC) işaretli BMP-6 içeren mikroküre yüklü kitosan doku iskeleleri ile yürütülmüş ve ölçümler floresan spektrofotometresi ile yapılmıştır. Doku iskelesi (10 mm çap, 1 mm kalınlık, 0,003 g) başına 100 ng BMP-6 yüklü aljinat mikrokürelerin, hücre kültür çalışmaları için kullanılması uygun görülmüştür.Hücre kültür çalışmaları, durgun ortam koşullarında sıçan kemik iliği mezenkimal kök hücreleri kullanılarak gerçekleştirilmiş; hücrelerin doku iskelelerine yapışmaları, büyümeleri ve osteojenik farklılaşmaları incelenmiştir. Aljinat mikrokürelerin BMP-6'nın kontrollü salımını desteklediği belirlenmiş, buna bağlı olarak, mezenkimal kök hücrelerin doku rejenerasyonu için daha uygun bir sürede osteojenik farklılaşmaları sağlanmıştır.Elde edilen sonuçlar değerlendirilerek, tez kapsamında üretilen sistemin periodontal doku mühendisliği için uygun olduğu belirlenmiş ve elektrospreyleme tekniğinin homojen boy ve boy dağılımına sahip mikroküre üretimi için önemli bir yöntem olduğu sonucuna varılmıştır.Anahtar kelimeler: Periodontal doku mühendisliği, BMP-6, kitosan doku iskelesi, aljinat mikroküre, mezenkimal kök hücre.