Yüksek verimli immünomanyetik ayırım için manyetik nanopartiküllerin geliştirilmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Gıda Mühendisliği A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2012
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: AKİF GÖKTUĞ BOZKURT
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): İSMAİL HAKKI BOYACI
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu çalışmada, nanopartiküllerin morfolojik ve manyetik özelliklerinin immünomanyetik ayırım üzerine etkileri incelenmiştir. İlk aşamada farklı özelliklere sahip üç çeşit altın kaplı manyetik nanopartikül (MNP) sentezlenmiş ve karakterizasyonları yapılmıştır. UV-vis Spektroskopisi nanopartiküllerin 510-575 nm dalga boyu arasındaki altın plazmon bantlarını, titreşimli örnek magnetometresi nanopartiküllerin manyetik özelliklerini belirlemek için kullanılmıştır. Altın nanopartiküller üzerine kendiliğinden oluşan tek tabakanın (SAM) varlığı ise FTIR spektroskopisi ile gösterilmiştir. Zeta potansiyel ölçümleri alınarak nanopartiküllerin yüzey özellikleri ve stabiliteleri kontrol edilmiştir. Escherichia coli (E. coli)'nin antikor işaretli MNP ile yakalanmasının ardından taramalı ve geçişli elektron mikroskopları (SEM ve TEM) ile görüntüleri alınarak karakterize edilmiştir.İkinci aşamada immünomanyetik ayırım için gerekli optimizasyonlar yapılmış ve en uygun sıcaklık 37°C ve en uygun süre 20 dakika olarak belirlenmiştir. Belirlenen sıcaklık ve sürede bakteri hücre sayısının ve immünoreaksiyon hacminin, nanopartiküllerin E. coli bağlama verimi üzerine etkisi araştırılmıştır. En düşük bakteri derişimi 101 kob/ml'de üç nanopartikül için en yüksek bağlanma verimi % 100 olarak bulunmuştur. Bakteri sayısı 107 kob/ml'ye çıkarıldığında bağlanma verimleri ise NP1, NP2 ve NP3 için sırasıyla, % 39.9, % 34.1 ve % 30.3 olarak bulunmuştur. İmmünoreaksiyon hacminin incelenmesi sırasında en düşük hacim olarak 100 µl ile çalışılmış ve bu hacimdeki bağlanma verimleri NP1, NP2 ve NP3 için sırasıyla % 95.6, % 88.6 ve % 84.6 olarak bulunmuştur. İmmünoreaksiyon hacmi 2000 µl'ye çıkarıldığında ise bağlanma verimleri % 58.2, % 51.3 ve % 39.6 değerlerine düşmüştür. Sonuç olarak bakteri sayısı ve immünoreaksiyon hacmi arttığında üç nanopartikül içinde bağlanma verimlerinin düştüğü gözlenmiştir. Sentezlenen nanopartiküllerle düşük hacimlerde az sayıdaki bakteri hücresi dahi hızlı ve hassas olarak yakalanabildiği ve analiz ortamından ayrılabildiği ortaya konmuştur.