The effect of inducible costimulatory ligand (İCOS-LG) expressing myeloid leukemia cells on helper t lymphocyte activation and exhaustion
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Temel Onkoloji A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2015
Tezin Dili: İngilizce
Öğrenci: DİDEM ÖZKAZANÇ
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): GÜNEŞ ESENDAĞLI
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:T hücre yorulması sürekli antijen uyarımı etkisinde kademeli olarak gelişen sitokin üretiminin kaybı, çoğalma kapasitesinde azalma ve tekrar aktivasyona direnç ile tanımlanmıştır. Yardımcı T lenfosit (Th) yanıtlarının, AML hücreleri tarafından uyarabilmesine rağmen, anti-lösemik etkisi sınırlıdır. Bu çalışmada, AML kaynaklı kostimülasyon sinyallerinin Th yorulmasına olan etkilerini incelemek amacıyla ilk kez bir in vitro model geliştirilmiştir. Öncelikle AML hücrelerinin (HL-60, THP-1, U937, Kasumi-1, KG-1) ve CD14+ monositlerin normal fizyolojik ve proinflamatuar koşullardaki ICOS-LG ifade düzeyleri ve zamana bağlı değişimleri belirlendi. Daha sonra, CD4+ T lenfositlerin AML hücre hatları veya monositler ile farklı hücre oranları ve farklı konsantrasyonlarda anti-CD3 (aCD3) uyarımı ile ko-kültürleri gerçekleştirildi. aCD3 ve kültür ortamı düzenli olarak tazelendi. Th hücrelerinin CD25, CD127, FoxP3, CD69, PD-L1, PD-1, CTLA-4, ICOS, TIM-3, LAG3, CD38, CD154, CCR7 ve HLA-DR ifade düzeyleri, çoğalma kapasiteleri ve canlılıkları akım sitometri ile saptandı. Kostimülasyon sinyallerinin T hücre yorulmasına olan etkileri ICOS-LG, PD-L1/PD-L2 ve CD80/CD86 bloklayıcı ajanlar ile test edildi. ELISA ile IL-2, IL-10, IL-4, TGF-, IFN-γ ve TNF-α düzeyleri belirlendi. Fonksiyonel yorulmanın test edilmesi için yorulmuş (TIM-3mo/hi) ve yorulmamış (TIM-3-/low) Th alt-popülasyonları zenginleştirildi ve tekrar uyarıldı. AML:Th ko-kültürlerinde Th hücreleri üzerinde LAG3, TIM-3, PD-1, CTLA-4 moleküllerin belirgin artışı saptandı. Monosit ko-kültürlerde ise Th aktivasyonu ve proliferasyonu AML hücreleri ile elde edilen sonuçlara benzer iken yorulma belirteçlerinin düzeyi anlamlı olarak düşük kaldı. Bu yorulmuş hücreler düşük düzeylerde IL-2, IFN-γ ve TNF-α üretti. Bu hücrelerin yorulmaları önceki çoğalma düzeylerinden bağımsızdı. AML-kaynaklı kostimülatör sinyallerin aCD3 uyarımına kıyasla Th yorulması için daha kritik olduğu görüldü. Yorulma dışarıdan verilen IL-2 ile geri döndürülebiliyordu. Bu bulgular, AML hücrelerinin kostimülasyon aracılığı ile Th yorulmasına neden olduğunu göstermekte ve yeni bir immün kaçış mekanizmasına işaret etmektedir.