Kemik iliği kökenli osteoblastik liyofilizatın kemik hasarlarında kullanılması
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji A.B.D., Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2011
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ÖMÜR BUL
Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): ÖZER AYLİN GÜRPINAR
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu tez çalışmasında, kemik iliğinden izole edilen osteoblastik hücreler liyofilize edilerek kullanılmıştır. Elde edilen liyofilizatın in vitro ortamda hücre canlılığı üzerindeki etkisine bakıldıktan sonra kemik hasarları üzerindeki etkisi incelenmiştir.İlk aşamada, kemik iliği mezenşimal hücreleri, sıçan kemik iliğinden primer kültür yöntemiyle izole edilmiştir. Ardından bu hücreler uygun farklılaştırma faktörlerini içeren besiortamı kullanılarak osteoblast hücrelerine farklılaştırılmıştır. Osteoblast hücreleri, kemik oluşumu ve yenilenmesinde esas görev alan hücrelerdir. Salgılamış oldukları proteinler ve biyomoleküllerle kemik hücrelerinin farlılaşmasında, hücre göçünü, proliferasyonunu ve aktivasyonunu düzenler. Bu tez çalışmasında, bu proteinler ve biyomoleküller osteoblastların liyofilizasyonu ile elde edilmiştir. Hazırlanan liyofilizatın in vitro ortamda L929 fibroblast hücreleri, osteoblast hücreleri ve mezenşimal hücreleri ile olan etkileşimlerine bakılmıştır. Bunun için MTT yöntemi ile hücre canlılığı, Giemsa boyaması ile hücre morfolojisi incelenmiştir. Çalışmanın bundan sonraki aşamasında in vivoda oluşturulan hasar üzerindeki etkisi incelenmiştir. Çalışma için kullanılan Wistar albino türü sıçanların tibialarında oluşturulan kritik boyutlu hasarlar, hazırlanan liyofilizat ile doldurulmuştur. Operasyonu takip eden 2., 4. ve 6. haftalarda hasarlı kemiklerden histolojik inceleme yapılmıştır.Sonuçlar, liyofilizatın in vitroda osteoblastlar üzerinde proliferasyonu arttırıcı bir etkiye sahip olduğunu göstermiştir. L929 hücreleri ve mezenşimal hücreleri üzerinde ise canlılığı arttıcı bir etki kaydedilmemiştir. Histolojik sonuçlarda, kontrol grubuyla karşılaştırıldığında, liyofilizatlı gruplarda endokondral kemikleşmenin ikinci haftadan itibaren şekillendiği görülmüştür.Bu çalışma, hücre liyofilizatının canlı hücrelerle olan etkileşimini ve hasarlı bölgedeki biyouyumluluğunu inceleyen temel bir çalışmadır. Kemik hasarları ile ilgili yapılan araştırma ve çalışmalara ışık tutacağına inanılmaktadır.