Denatüre edici yüksek performanslı sıvı kromatografisi yöntemi ile biyotinidaz eksikliği ve lizinürik protein intoleransı görülen hastalarda mutasyon taraması

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Hacettepe Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji A.B.D., Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2010

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: AYŞEGÜL GÜZEL

Asıl Danışman (Eş Danışmanlı Tezler İçin): RIZA KÖKSAL ÖZGÜL

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu tez çalışmasında, denatüre edici yüksek performanslı sıvı kromatografisi (dHPLC) yöntemi ile iki farklı kalıtsal metabolik hastalık için mutasyon taraması yapılmıştır.Biyotinidaz eksikliğinden sorumlu BTD geninde ve lizinurik protein intoleransından sorumlu SLC7A7 geninde, dHPLC analizi ile mutasyon ön taraması yapılarak mutasyonun bulunduğu genomik bölgeler saptanmıştır. Bu bölgelerde yer alan mutasyonların yeri ve tipinin belirlenmesi amacıyla DNA dizi analizi yöntemi kullanılmıştır. DNA dizi analizi sonucunda, her iki hasta grubunda BTD ve SLC7A7 genlerinde bilinen ve yeni tanımlanan mutasyonlar saptanmıştır. dHPLC yöntemi ile çalışılan hasta grubunun tamamında mutasyonların bulunduğu genomik bölgeler %100 doğrulukla belirlenmiştir.Biyotinidaz eksikliğine neden olan mutasyonların protein üzerindeki etkisinin incelenmesi amacıyla, bulunan mutasyonlar ve biyotinidaz enzim aktiviteleri arasındaki ilişki karşılaştırılmıştır.dHPLC yöntemi, mutasyon ön tarama yöntemleri arasında kolay uygulanabilirliği, %95'in üzerinde mutasyon saptama oranı ve kısa analiz süresi ile diğer metotlara göre daha etkin bir mutasyon tarama yöntemidir.